| 摘要 |
본 발명은 기존의 염기 특이 반응성 PCR(allele-specific PCR)의 문제점을 해결하기 위하여 고안된 염기 특이 반응성 프라이머(Allele-specific reactive primer; ASRP)를 이용한 핵산 증폭방법에 관한 것으로, 더욱 자세하게는, 교정활성(proofreading)을 가지는 DNA 중합효소(DNA polymerase) 및 표적핵산과 상보적인 염기서열을 포함하고, 3' 말단에 비상보적 염기가 존재할 때 상기 DNA 중합효소의 교정활성에 의해 잘려나가는 염기의 5' 방향으로 바로 앞쪽의 염기부터 5' 말단까지의 염기 중의 하나 이상이 중합반응의 시발체로 작용할 수 없도록 변형된 염기 특이 반응성 프라이머 (Allele-specific reactive primer; ASRP)의 존재하에 표적핵산을 증폭시키는 것을 특징으로 하는 표적핵산의 검출방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 대립형질 특이반응성 프라이머를 이용한 검출방법은 ASRP 및 교정반응 DNA 중합효소의 특성상 증폭의 특이도가 매우 높은 기술로서, 단일염기다형성(SNP; Single Nucletide Polymorphism)를 포함하는 돌연변이(점돌연변이, 삽입, 결실)를 효과적으로 검출할 수 있으며, 바이설파이트(bisulfate) 처리 후 CpG 메틸화 유무를 검출하거나, DNA 라이브러리에서 원하는 염기서열로 시작되는 목적 DNA를 증폭하여 검출하는데도 활용할 수 있다. |
