高精度测量猪尿中的克仑特罗含量的方法

摘要

本发明公开了一种高精度测量猪尿中的克仑特罗含量的方法，包括以下步骤：步骤1：样品预处理；收集猪尿，并加入三氯乙酸沉淀猪尿中的蛋白质，加入80％VOL的2mol/L的乙酸铵缓冲液，漩涡混合器混合后离心；取离心后的上清液；步骤2：将上清液加入到SLE柱后，静置2～4分钟；步骤3：采用二元洗脱剂对SLE柱洗脱至少两次，接收洗脱液，得到含有克仑特罗的洗脱液，步骤4：采用高效液相色谱法对步骤3得到的洗脱液进行检测。本发明的目的在于提供一种分离效果好、有利于后续测试工作进行的高精度测量猪尿中的克仑特罗含量的方法。

主权项

一种高精度测量猪尿中的克仑特罗含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：样品预处理；收集猪尿，并加入三氯乙酸沉淀猪尿中的蛋白质，加入4倍猪尿体积的2mol/L的乙酸铵缓冲液，漩涡混合器混合后离心；取离心后的上清液；步骤2：将上清液加入到SLE柱后，静置2～4分钟；步骤3：采用二元洗脱剂对SLE柱洗脱至少两次，每次洗脱时所用的洗脱剂为0.5ml，接收洗脱液，得到含有克仑特罗的洗脱液；步骤4：采用高效液相色谱法对步骤3得到的洗脱液进行检测，同时采用不同浓度的克仑特罗标准溶液绘制标准回归曲线，所述的高效液相色谱法的具体参数为：色谱柱：C18柱，150mm*3.9mmID柱温：室温流动相：0.05％磷酸水溶液和乙腈的混合液，其中0.05％磷酸水溶液和乙腈的体积比为100:12；检测器：UV检测器；检测波长：210nm；进样量：50μL；其中，所述的二元洗脱剂为乙酸乙酯和乙酸甲酯的混合物，其中乙酸乙酯和乙酸甲酯的重量比为1:0.5～1。