一种改进的亚硫酸盐测序方法

摘要

本发明涉及生物DNA甲基化技术，具体地说是一种改进的亚硫酸盐测序方法。将基因组DNA经酶切纯化，纯化后加入亚硫酸盐修饰液进行解链与修饰；修饰后纯化回收测序，即实现基因组DNA的测序；所述亚硫酸盐修饰液为500-550ul、100-120μLNaOH、0.5-0.6mg水溶性维生素E（Trolox）、10-15μL三烯丙基氰脲酸酯、0.037-0.040g四乙烯五胺五盐酸盐（TETRAEN）、37.5-40.0μL盐酸胍溶液、0.3422-0.3800g偏重亚硫酸钠、20-30μL对苯二酚和100-120ul无菌水；PH=5.0-5.1。本发明的测序方法所得基因组，提高了生物基因组DNA CG位点的转化率。本发明方法快速、准确、转化率高。

主权项

一种改进的亚硫酸盐测序方法，其特征在于：将基因组DNA经酶切纯化，纯化后加入亚硫酸盐修饰液进行解链与修饰；修饰后纯化回收测序，即实现基因组DNA的测序；所述亚硫酸盐修饰液为600ul无菌水、100‑120μLNaOH、0.5‑0.6mg水溶性维生素E(Trolox)、10‑15μL三烯丙基氰脲酸酯、0.037‑0.040g四乙烯五胺五盐酸盐(TETRAEN)、37.5‑40.0μL盐酸胍溶液、0.3422‑0.3800g偏重亚硫酸钠、20‑30μL对苯二酚和100‑120ul无菌水；PH＝5.0‑5.1。