一种检测邻苯二甲酸二甲酯的方法及试剂盒

摘要

本发明公开了一种检测邻苯二甲酸二甲酯的方法及试剂盒，属于生物检测领域。本发明通过化学方法合成了DMP人工抗原，再用DMP人工抗原免疫BALB/c小鼠，取免疫小鼠的脾细胞与SP2/0细胞融合筛选得到分泌DMP单克隆抗体的杂交瘤细胞株；再以合成的DMP人工抗原作为包被抗原、DMP单克隆抗体作为一抗创建了检测DMP的间接竞争ELISA方法和试剂盒，可用于样品中的DMP测定，该方法具有操作简单、费用低廉、快速灵敏等优点。

主权项

一种分泌邻苯二甲酸二甲酯单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其特征在于：通过包含如下步骤的方法制备得到：（1）取用DMP人工抗原免疫BALB/c小鼠的脾细胞与SP2/0细胞悬液混合；（2）离心弃上清，加入PEG使细胞融合，再加入1640培养基终止PEG的作用；重复该步骤；（3）离心弃上清，加入HAT培养基，铺至细胞板中进行培养；（4）融合后第7天观察，标出有融合细胞的孔，记录位置和克隆数，补加HAT培养基；2周后，用HAT培养基全量换液，待细胞长至板底1/10时做检测；（5）选择效价最高的并且对DMP具有特异性的阳性细胞进行克隆，克隆化结束后，建株得到分泌DMP单克隆抗体的杂交瘤细胞株。