发明名称 |
基于硫酸苯酚快速高通量测定多糖含量的方法 |
摘要 |
本发明公开了一种基于硫酸苯酚快速高通量测定多糖含量的方法,其特征在于,包括以下步骤:将多糖测定液和浓硫酸同时添加到微孔板中,多糖水解成单糖并迅速脱水形成糠醛衍生物;微孔板中继续添加苯酚,苯酚与糠醛衍生物反应生成橙黄色液体,反应温度为90℃、时间为23min,反应完成后再进行5min冷却处理;在酶标仪中于490nm下测定多糖的光吸收值;以葡萄糖溶液为标准液,绘制标准曲线,将多糖的光吸收值带入标准曲线中计算多糖含量。本发明的有益之处在于:方法简单、快速、灵敏、重复性好,颜色持久,对每种糖仅制作一条标准曲线;对于杂多糖,在没有必要细致划分各种单糖的情况下,可以一次测出总量;可用于甲基化的糖、戊糖以及寡糖类和多聚糖的测定。 |
申请公布号 |
CN103901031A |
申请公布日期 |
2014.07.02 |
申请号 |
CN201410149074.1 |
申请日期 |
2014.04.14 |
申请人 |
中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 |
发明人 |
王晓力;王永刚;曾玉峰;朱新强;王春梅;张茜;路远;王慧;汪晓斌;杨晓 |
分类号 |
G01N21/78(2006.01)I;G01N21/31(2006.01)I |
主分类号 |
G01N21/78(2006.01)I |
代理机构 |
北京世誉鑫诚专利代理事务所(普通合伙) 11368 |
代理人 |
郭官厚 |
主权项 |
基于硫酸苯酚快速高通量测定多糖含量的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将多糖测定液和浓硫酸同时添加到微孔板中,在浓硫酸的作用下多糖水解成单糖并迅速脱水形成糠醛衍生物;(2)向微孔板中继续添加苯酚,苯酚与糠醛衍生物反应生成橙黄色液体;(3)在酶标仪中于490nm下测定多糖的光吸收值;(4)以葡萄糖溶液为标准液,绘制标准曲线;(5)将多糖的光吸收值带入标准曲线中计算多糖含量。 |
地址 |
734099 甘肃省兰州市七里河区小西湖硷沟沿335号汉 |