一种抗人BTF的多克隆抗体的制备方法

摘要

发明涉及抗体工程和医学领域，具体提供了一种特异性抗人BTF（Bcl-2-associated transcription factor1）的多克隆抗体的制备方法。本发明提供的具体制备方法是截取编码BTF蛋白C端663-863氨基酸核苷酸序列克隆至pMAL-5X质粒中，转化大肠杆菌Rosetta-gami(DE3)pLysS，低温诱导表达，裂解后Amylose Resin柱亲和纯化，麦芽洗脱，收集蛋白。SDS-PAGE电泳后，割下目的条带，加入佐剂乳化后多次免疫日本大耳白兔，收集抗血清。抗原偶联至溴化氢活化Sepharose4B介质，亲和纯化多克隆抗体。

主权项

一种制备抗人BTF的多克隆抗体制备方法，其特征在于：1）克隆编码BTF蛋白C端663‑863氨基酸核苷酸序列；2）利用步骤1）所得核酸片段构建重组pMAL‑5X质粒，转化大肠杆菌Rosetta‑gami(DE3)pLysS，培养，在26℃下诱导表达2‑6小时，裂解后Amylose Resin柱亲和纯化，麦芽糖洗脱，收集纯化蛋白；3）以步骤2）所得蛋白质为抗原加入佐剂乳化后多次免疫日本大耳白兔，收集抗血清；4）采用抗原偶联至溴化氢活化Sepharose4B介质，亲和纯化步骤3）中的抗血清，即得。