蛋白质的聚电解质沉淀和纯化

摘要

本发明提供了用于分离和纯化抗体的方法，其通过添加聚电解质至细胞培养液，诸如已收获的细胞培养液，并沉淀抗体-聚电解质复合物或杂质与聚电解质的复合物。

主权项

一种纯化抗体的方法，包括：(a)调节含有抗体的混合物的酸度或盐浓度，其中该抗体来自已收获的细胞培养液且该已收获的细胞培养液来自哺乳动物细胞培养物；(b)添加带负电荷的聚电解质，由此形成包含所述带负电荷的聚电解质和所述抗体的蛋白质‑聚电解质沉淀，其中所述带负电荷的聚电解质选自聚乙烯基磺酸、聚乙烯基磺酸盐、聚苯乙烯磺酸、和聚丙烯酸且其中所述带负电荷的聚电解质具有1.2到1,100kDa的分子量，其中所述抗体选自抗CD20抗体、抗DR5抗体、和抗CMET抗体；(c)将蛋白质‑聚电解质沉淀与选自下组的杂质分开：蛋白质聚集体、蛋白质片段、宿主细胞蛋白质、胰岛素、庆大霉素、DNA、和浸出的蛋白A；(d)分离蛋白质‑聚电解质沉淀；并(e)在水溶液中重悬浮蛋白质‑聚电解质沉淀。