一种检测猪伪狂犬病毒抗体的试剂盒及阻断ELISA检测方法

摘要

本发明公开了一种检测猪伪狂犬病毒抗体的试剂盒及阻断ELISA检测方法，包括辣根过氧化物酶标记的猪伪狂犬病毒单克隆抗体、猪伪狂犬病毒单克隆抗体是以猪伪狂犬病毒为免疫原得到的单克隆抗体、猪伪狂犬病毒为伪狂犬病毒鄂A株；试剂盒还包括酶标板、样品稀释液、阴（阳）性对照、显色液、洗涤液、终止液；其步骤：a、从试剂盒中取出预包被有病毒抗原的检测板，将稀释好的待检血清加入抗原包被板中，同时设阴、阳性对照孔；b、振匀孔中样品，甩掉板孔中的溶液，用洗涤液洗；c、每孔加酶标单抗，洗涤，加显色液，室温避光显色，加终止液，用酶标仪测定每孔OD630nm读值。该方法特异性好，灵敏度高。检测时间短；结果判定采用S/N比值法，准确性高。

主权项

一种检测猪伪狂犬病毒抗体的酶联免疫试剂盒，其特征在于：包括辣根过氧化物酶标记的猪伪狂犬病毒的单克隆抗体、猪伪狂犬病毒单克隆抗体是以猪伪狂犬病毒为免疫原得到的单克隆抗体、猪伪狂犬病毒为伪狂犬病毒鄂A株；所述的试剂盒还包括酶标板、样品稀释液、阳性对照、阴性对照、显色液A、显色液B、洗涤液、终止液；所述的酶标板是以猪伪狂犬病毒在包被酶标板时用0.1mol/L，pH9.6的碳酸氢钠溶液作为包被缓冲液；所述的阳性对照为猪伪狂犬病毒免疫的高免血清；所述的阴性对照血清为未感染过猪伪狂犬病毒的健康猪血清；所述的洗涤液为含有0.05%Tween‑20的PBS缓冲液；所述终止液为含0.25%体积比氢氟酸溶液；所述的显色液A为含有50mg/mL过氧化氢脲的柠檬酸盐缓冲液，显色液B液为含有0.2mg/mL TMB pH5.0的柠檬酸/柠檬酸钠缓冲液；所述的样品稀释液液为含2.5mg/mL的明胶的DMEM培养基。