一种利用电穿孔辅助基因转移的方法及装置

摘要

本发明属眼科医学技术领域，涉及一种利用电穿孔辅助基因转移的方法及装置，本发明采用双勺型电极装置，确定适宜的电刺激脉冲条件，利用电穿孔的方法将含有绿色荧光蛋白的质粒转染视网膜色素上皮细胞层。本发明方法借助电场，能有方向性的控制基因眼内转染，同时避免了病毒转基因所带来的细胞免疫源性和潜在致病性、致瘤性等弊端，采用的双勺型电极装置能降低眼球的副损伤。本发明方法具有操作便捷、高效等优点，并且可同时实现多种质粒的转染，弥补了传统方法的不足之处。本发明为眼科研究的基因导入提供了可参考的方法。

主权项

一种利用电穿孔辅助基因转移的方法，其特征在于，采用专用电极装置，确定适宜的电刺激脉冲条件，利用电穿孔的方法将含有绿色荧光蛋白的质粒转染视网膜色素上皮细胞层，其包括下述步骤：1)设计和制作电极，根据眼科常用角膜半径和曲率参数制作系列不同规格的电极；2)构建和制备含有目的基因的质粒，3)设计电刺激脉冲条件在安全电场的范围内，设计电压范围5V至35V的七组电脉冲刺激条件；4)电穿孔辅助基因转染将电极连接电刺激发生器，在电穿孔刺激模式下，将带负电荷的质粒在内正外负的电场作用下，转染经处理所得的视网膜色素上皮细胞层。