VECTOR FOR SECRETION OF PROTEINS DIRECTLY INTO PERIPLASM OR CULTURE MEDIUM.

摘要

L'ivention concerne l'utilisation du domaine II des gènes exotoxines Pseudomonas dans E. coli, de préférence sous le contrôle d'un promoteur T7. Sans une séquence de signaux, l'exotoxine Pseudomonas s'accumule dans la cellule mais elle est secrétée dans le périplasme lorsqu'une partie ou la totalité du domaine I est éliminée. PE apparaît dans le périplasme et le milieu de culture lorsque les domaines I et une partie du domaine II sont éliminés. Le domaine II seul est secrété dans le périplasme, tandis que le domaine III seul reste dans la cellule. L'addition d'une séquence de signaux OmpA se traduit par la secrétion de PE mature dans le périplasme et la secrétion du domaine II-III dans le milieu. Une protéine composée du facteur alpha de transformation de croissance fusionné sur l'extrémité amino du domaine II-III est secrétée dans le périplasme sans une séquence de siganux et dans le milieu avec une séquence de signaux. Une protéine composée du domaine II ou du domaine II-II fusionné sur l'extrémité amino d'une phosphatase alcaline est secrétée dans le périplasme et dans le milieu avec ou sans séquence de signaux.