| 主权项 |
1.制备、分离和纯化具有抗生素效果之 多胜谓之为表皮素(epidermin) 者之方法,特点在于具有下式之胺酸 组成:Asn(1),Pro(1), Gly(2),Ala(2),Ile(2), Phe(2),Lys(2),Lan(2), -me-Lan(1),Dnd(1), Tyr(1),S-(2-胺基乙烯基) -D-半胱胺酸及下示之主要构造: 虽接近N-末端之个别硫醚胺酸 之一半具有D构型及特点在于具有下 述额外之变数: 性质:无色粉末; 溶解性:极易溶于水/冰醋酸或甲 醇/冰醋酸此混合物内,溶于低醇 、不溶于氯仿、丙 、乙醚、石油 醚; 在矽胶上呈色反应: 满三酯、氯 /TMD[TDM=4,4'一双 -(二甲胺基)二苯基甲烷]、苔 黑素/H2SO4.茴醛/H2SO4 。在254nm紫外光下之非破坏的 检测并喷以水。 薄层层析:现成的矽胶板60F254 (MERCK)被用之。 物系A:氯仿/甲醇/17%NH3 (2/2/1) RF=0.73 物系B:氯仿/甲醇/17%NH3 (70/35/10) RF=0.30 物系C:正丁醇/冰醋酸/水(4 /1/1) RF=0.05 HPLC:见图7。 安定性:在PH2-7下安定,但在 在较高PH下药效激减: 分子质量:在2160之区域利(无 阴离子): 紫外光吸收谱:在水溶液内,最大 长波显现于267nm(请见图3) ; 红外光吸收谱:在KBr锭内样品 之IR谱(请见图4) 核磁共振谱 1H-NMR谱:请见图5,13C- NMR 谱:请见图6。 此方法特点在于使表面葡萄菌 DSM 3095 在34-37℃下于 一由2-4%之N源似肉萃取物、1 -3%之糖或糖醇作为碳源及0.25 -1%之选自镁及钙之硷土金属的碳 酸盐及/或0.25-0.5%之选自镁 及钙之硷土金属的氢氧化物所组成之 复杂养分液内作好气性生长经12至 25小时,继于除去细胞和无机盐后 ,为了分杂形成之有效物质,或用丁 醇在PH8萃取培养液,将丁醇萃出 物蒸发,使残物溶于甲醇内并藉乙醚 沈淀除去溶液中脂质沾染物,或经基 于丙烯酸酯或聚苯乙烯之聚合物处理 ,虽被吸附之表面皮因用甲醇/浓 HC1(99:1)而自树脂中释出 ,此液然后为氨中和及在真空内蒸浓 ,以由是而得之分离物质行凝胶层析 [Sephadex LH-20,用甲醇/ 乙酸(95:5)]以分离其他低分 子量之胜、胺酸和盐,然后依 Craig 法行多次逆流分布,其中第 一次之液体一液体分布系由正丁醇/ 乙酸乙脂/0.1N乙酸(3:1:3 )之物系而达至,其中表皮素留在基 线,及随后在用2-丁醇/0.05N 乙醯铵(1:1)之中性物系行第二 次分布中,藉冷冻乾燥自溶离液内分 离出为无色粉末之表皮素。2.如上述第1.项所请求 之方法,特点在 于将作为N源之2-4%重量之肉萃 出物,胺酸浓度为2g/ 之所有 20种胺酸之混合物或于胺酸存在下 之2-4酪蛋白胺酸及作为碳源之1 -3%重量之麦芽萃出物,麦芽糖、 半乳糖、乳糖、甘露糖、葡萄糖、甘 油或乳糖与麦芽糖或半乳糖与麦芽糖 之混合物及0.25-1%重量之 CaCO3或0.25-0.5%重量之 Ca(OH)2加入至酸酵培养基,且 若属所希,将生物素、菸硷酸、硫胺 素、 哆醇、HC1和泛酸钙,于醱 酵前将PH调节至6.0-7.0及生产 过程可由连续取样以盘控。 |
