油田水样中硝酸盐还原-硫离子氧化细菌NR-SOB的检测方法

摘要

本发明涉及一种油田水样中硝酸盐还原-硫离子氧化细菌NR-SOB的检测方法。本发明属于微生物检测技术领域。油田水样中硝酸盐还原-硫离子氧化细菌NR-SOB的检测方法，包括以下步骤：1）材料清洗：将玻璃器皿、橡胶塞和铝箔盖清洗干净；2）配制NR-SOB测试培养基；3）灭菌：将配制的NR-SOB测试培养基装于器皿中，纱布封口，用蒸汽灭菌锅灭菌；4）除氧、加硫、分装：除氧：将灭菌后的培养基置于厌氧工作站中除氧；Na2S·9H2O母液加入培养基中；分装：用移液器分装进洗净的玻璃瓶内。5）NR-SOB菌检测：采用绝迹稀释法，检测待测水样中细菌的数目。本发明具有操作简单，配制方便，测试便捷，数据准确，可靠性强，经济实用，快速准确，方便用于油田微生物的检测等优点。

主权项

油田水样中硝酸盐还原‑硫离子氧化细菌NR‑SOB的检测方法，其特征是：检测方包括以下步骤：1）材料清洗将玻璃器皿、橡胶塞和铝箔盖清洗干净，空干残水，待用；2）培养基配制配制NR‑SOB测试培养基：NR‑SOB培养基中包括组份及其含量：NaHCO3 1.6－2.1g/L，乙酸钠0.6－0.8g/L，KNO3 0.8－1.2g/L，NH4Cl 0.01－0.03g/L，（NH4）2SO4 0.1－0.2g/L，KH2PO4 0.5－0.7g/L，Na2HPO4 0.6－0.8g/L，NaCl 6－8g/L，CaCl2·2H2O 0.2－0.4g/L，MgSO4·7H2O 0.7－0.9g/L，FeCl3 0.0002‑0.0003g/L，刃天青0.0005‑0.002g/L，半胱氨酸盐酸盐0.4－0.6g/L，微量营养液0.5mL；微量营养液组成：MnSO4·H2O 2－3g/L，ZnSO4·7H2O 0.4－0.6g/L，CuSO4·5H2O0.02－0.03g/L，Na2MoO4·2H2O 0.02－0.03g/L，CoCl2·6H2O 0.04－0.05g/L，H2SO40.4‑0.6mL/L；3）灭菌将配制的NR‑SOB测试培养基装于器皿中，纱布封口，用蒸汽灭菌锅灭菌；4）除氧、加硫、分装除氧：将灭菌后的培养基置于厌氧工作站中，除氧1h，直至培养基颜色由粉色变为无色；加硫：1M Na2S·9H2O母液用0.22μm滤膜过滤除菌，加入培养基中，使S2‑终浓度为80ppm；分装：用移液器以9mL/瓶的量装进洗净的玻璃瓶内，盖上橡胶塞和铝箔盖，再用压盖器将其压紧密封；5）NR‑SOB菌检测测定待测水样中的NR‑SOB菌的菌数时，采用绝迹稀释法，将待测水样置于厌氧工作站中，平衡至不含氧气，用无菌注射器逐级注入测试瓶中稀释培养，直到最后一个测试瓶无菌生长为止，根据稀释的倍数计算出待测水样中细菌的数目。