一种对生物样品进行富集和除盐净化处理的方法

摘要

本发明属于生化分析技术领域，具体涉及一种利用图案化表面对生物样品进行一步富集和除盐净化的处理方法，这种图案化表面可以被广泛地应用于生物样品的预处理及检测。其步骤为：在基底上构筑疏水-亲水-疏水区域的封闭图案化表面；将多肽或蛋白溶液滴在上述步骤制备的图案化表面上，在室温下自然晾干，从而得到干燥的样品点；将基质溶液滴在上述干燥的样品点上，室温下自然晾干后，在图案化表面上形成样品和基质均匀的共结晶，从而实现对生物样品进行富集和除盐净化处理。利用本发明构筑的图案化表面，在MALDI-TOF MS检测中，信噪比、灵敏度及耐盐能力都有很显著的提高，具有很大的实际应用价值。

主权项

一种对生物样品进行富集和除盐净化处理的方法，其步骤为：1)在基底上构筑疏水‑亲水‑疏水区域的封闭图案化表面；a)选取基底，对基底进行清洁及亲水化处理；b)在基底上构筑厚度0.2～200μm、半径250～1000μm的聚合物涂层；c)以步骤B构筑的聚合物涂层为挡层，在挡层以外的基底上修饰含氟单分子层或蒸镀金属层作为疏水层，其厚度为20～200nm；d)将步骤C得到的基底浸入有机溶剂中进行超声处理除去聚合物挡层，随后用水超声除去基底上残留的有机溶剂，从而在基底上形成半径250～1000μm的空白亲水区域；e)在步骤D得到的基底的空白亲水区域中央制备厚度0.2～200μm、半径10～500μm的聚合物层或金属层，作为中央疏水区域，从而在基底上得到疏水‑亲水‑疏水区域结构的封闭图案化表面。2)将1～5μL多肽或蛋白溶液滴在上述步骤制备的图案化表面上，在室温下自然晾干，从而得到干燥的样品点；3)将1～5μL、5～20mg/ml的基质溶液滴在上述干燥的样品点上，室温下自然晾干后，在图案化表面上形成样品和基质均匀的共结晶，从而实现对生物样品进行富集和除盐净化处理。