酵母展示型聚半乳糖醛酸酶协同超声波处理提取紫菜多糖的方法

摘要

本发明公开了一种酵母展示型聚半乳糖醛酸酶协同超声波处理提取紫菜多糖的方法，包括：将紫菜干粉、酵母展示型聚半乳糖醛酸酶加入水中混匀，于35～37℃搅拌反应30～45分钟，再于28～35℃利用功率为730～750W的超声波破碎1～2小时，得到细胞破碎液，分离纯化制得紫菜多糖。本发明通过将聚半乳糖醛酸酶展示在毕赤酵母细胞外，利用该酶制剂协同超声波处理破碎紫菜细胞，工艺简便、条件温和、易于控制、安全可靠，能获得较高得率、较高纯度的紫菜多糖。

主权项

一种酵母展示型聚半乳糖醛酸酶协同超声波处理提取紫菜多糖的方法，包括：将紫菜干粉、酵母展示型聚半乳糖醛酸酶加入水中混匀，于35～37℃搅拌反应30～45分钟，再于28～35℃利用功率为730～750W的超声波破碎1～2小时，得到细胞破碎液，分离纯化制得紫菜多糖；所述的酵母展示型聚半乳糖醛酸酶通过如下方法制备：将经线性化处理的重组质粒转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115，将所得转化子接种于BMMY培养基中，诱导培养72～144小时后离心收集菌体，菌体经冲洗和冷冻干燥制得酵母展示型聚半乳糖醛酸酶；所述的重组质粒由原始载体pPIC9K和依次插入原始载体pPIC9K中MFα1信号肽下游的聚半乳糖醛酸酶基因、毕赤酵母GS115的细胞壁α凝集素基因组成。