杀菌肽－X的发酵工艺

摘要

本发明公开了一种杀菌肽－X的发酵工艺。本发明通过选择用于发酵的菌种种龄和优化培养基，使融合蛋白得到高表达，最终每升发酵液可获得包涵体5.05g，其中融合蛋白的含量＞80％。本发明是一种稳定、高表达并适于工业化生产的杀菌肽－X发酵工艺。

主权项

1、一种杀菌肽-X的发酵工艺，其特征在于该工艺包括下列步骤：(1)发酵种子：菌体OD600在0.48～1.0菌种种龄的种子；(2)发酵培养基：改良的TB培养基，每升培养基中含：细菌培养用胰化蛋白胨12g，细菌培养用酵母提取物24g，甘油4ml，KH2PO4 2.31g，K2HPO4·3H2O含量在1.64g/L～16.4g/L；(3)发酵工艺：在发酵罐中加入培养基，接种OD600在0.48～1.0的菌种，在通气量160l/h，罐压0.02～0.04MPa，温度37℃，搅拌转速150r/min的条件下，发酵12小时；放罐后，离心收集菌体，悬浮于磷酸缓冲液中，用均质机破碎细胞，然后于10000r/min离心破碎细胞，收集沉淀；沉淀依次用尿素，0.5％NaCl/2％Triton，TE溶液pH8.0洗涤后得到杀菌肽-X包涵体。