在存在内标物的情况下通过用染料标记对闭合膜结构上的细胞表面蛋白的差示分析

摘要

本发明公开了匹配的荧光试剂，并描述了一种方法，该方法用于可再生性地标记膜成分例如那些在细胞表面表达的膜成分，随后差示分析该标记的成分来检测不同细胞类型和状态之间的差别。此外，当前的方法利用了一种内标物来使跨凝胶的蛋白质模式相匹配，从而避免凝胶－对－凝胶的变异。根据本发明的方法可特别用于，例如，检测低丰度的膜蛋白、检测在细胞膜中表达的受体中的变化，例如，在配体结合或响应刺激时的变化。

主权项

1.一种检测来自至少两个含有闭合膜结构的样品的表面膜成分之间的差别的方法，所述方法包括：i)用选自染料配组的染料接触每个样品的独立等分试样，其中在所述配组中的每种染料能够选择性地标记所述膜成分，并且其中每种染料能够发出冷光，所述冷光具有可区别性地不同于所述配组中其余染料所发出的冷光的性质；ii)从每个独立等分试样中制备染料标记的成分的提取物；iii)分离不同的染料标记的成分；和iv)检测所述样品中不同的染料标记的成分之间发光性质的差别；其特征是所述分离步骤iii)在存在内标物的情况下进行，所述内标物包含膜成分提取物，所述膜成分来自所述至少两个样品的等分试样的集中混合物，并且其中使包含膜结构的样品的所述集中混合物与选自所述染料配组的不同染料接触。