发明名称 腺苷脱氨酶活性测定方法及腺苷脱氨酶诊断试剂盒
摘要 本发明涉及一种测定腺苷脱氨酶活性的方法,同时本发明还涉及腺苷脱氨酶诊断试剂盒,属于医学检验测定技术领域。该试剂盒包括缓冲液、腺苷、谷氨酸、还原型辅酶、腺苷三磷酸、丙酮酸、磷酸烯醇式丙酮酸、谷氨酰胺合成酶、丙酮酸氧化酶、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶、苹果酸脱氢酶、稳定剂,通过将样品与试剂按一定的体积比混合,使之发生酶偶联反应,再将最终反应物置于生化分析仪下,检测主波长吸光度变化的情况(速度),从而测算出腺苷脱氨酶的活性大小。采用本发明完全可以通过生化分析仪器得出所需的测定结果,并且灵敏度高、精确度好,不受内外源物质的污染,便于推广应用。
申请公布号 CN1769478A 申请公布日期 2006.05.10
申请号 CN200410065604.0 申请日期 2004.11.05
申请人 王尔中 发明人 王尔中
分类号 C12Q1/32(2006.01) 主分类号 C12Q1/32(2006.01)
代理机构 南京苏科专利代理有限责任公司 代理人 何朝旭
主权项 1.一种测定腺苷脱氨酶活性的方法,步骤如下:1)、将样品与主要由腺苷、谷氨酸、还原型辅酶、腺苷三磷酸、丙酮酸、磷酸烯醇式丙酮酸、谷氨酰胺合成酶、丙酮酸氧化酶、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶、苹果酸脱氢酶组成的试剂混合,使之发生如下原理的反应:腺苷+水 腺苷脱氨酶 肌苷+氨离子腺苷三磷酸+谷氨酸+氨 谷氨酰胺合成酶 腺苷二磷酸+ 磷酸根+谷氨酰胺磷酸根+丙酮酸+氧+水 丙酮酸氧化酶 乙酰磷酸+ 二氧化碳+过氧化氢二氧化碳+磷酸烯醇式丙酮酸 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶 草酰乙酸+磷酸根草酰乙酸+还原型辅酶 苹果酸脱氢酶 苹果酸+氧化型辅酶2)、检测最终反应物在主波长340nm吸光度下降的速度,测算出腺苷脱氨酶的活性大小。
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