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Un procedimiento para la puesta a disposicion de una célula eucariotica DHFR negativa, que comprende las etapas de: (a) la célula es transfectada con unprimer vector que comprende (i) al menos una secuencia diana para una recombinasa sitio-específica , (ii) secuencias de ADN homologas a una secuencia de ácidonucleico DHFR presente endogenamente en la célula que flanquean la secuencia (i), para permitir una recombinacion homologa, y (iii) en caso dado, un genmarcador de seleccionpositiva y, en ca so dado un gen marcador de seleccion negativa, (b) la célula transfectada es cultivada bajo condiciones las cualesproduce una recombinacion homologa del vector, y (c) la célula obtenida segun el paso (b) es recuperada. La presentetambién se refiere a un procedimiento parala introduccion de un gen DHFR heterologo en la célula obtenida por dicho procedimiento, a un vector para llevar a cabo dichos procedimientos y a una célulaeucariotica obtenida por dichos procedimientos.
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