PREPARACION Y UTILIZACION DE GENOTECAS DE ANTICUERPOS HUMANOS SINTETICOS (BIBLIOTECAS DE ANTICUERPOS HUMANOS SINTETICOS).

摘要

LA INVENCION CONCIERNE A LA PRODUCCION Y APLICACION DE BANCOS DE GENES DE ANTICUERPOS SINTETICOS HUMANOS (HUAK) O PARTES DE ANTICUERPOS QUE CONTENGAN AMBITOS ANTIGENOS. PARTIENDO DE UN ARMAZON HUAK EN UN VECTOR A PROPOSITO, SE FORMAN LAS AREAS HIPERVARIABLES DE LOS ANTICUERPOS CDNA MEDIANTE OLIGONUCLEOTIDAS SINTETIZADAS APROXIMATIVAS "CASUALES" ("RANDOM"). LOS AMINOACIDOS RELATIVAMENTE CONSERVADOS EN LAS AREAS HIPERVARIABLES SON CONSIDERADOS MEDIANTE LA SELECCION DE LAS CORRESPONDIENTES NUCLEOTIDAS DURANTE LA SINTESIS DE OLIGONUCLEOTIDAS, ASI COMO LA RELACION DE LAS NUCLEOTIDAS ESTABLECIDAS ENTRE ELLAS SE DA DE TAL MANERA QUE UN "NONSENSE-CODON" SOLO PUEDE ESPERARSE COMO MAXIMO EN CADA POSICION 89. MEDIANTE LA EXPRESION DE ESTAS HUAK CDNA SINTETICAS EN SISTEMAS DE EXPRESION MICROBICAS, POR EJEMPLO EL VECTOR PFMT DESCRITO A CONTINUACION EN E.COLI, PONE ASI A DISPOSICION UNA BIBLIOTECA HUAK SINTETICA CON UN EXTENSO REPERTORIO PARA EL EXAMEN ("SCREENEN") CON ANTIGENOS SELECCIONADOS IN VITRO.