蓖麻毒素的新型生物条形码检测方法

摘要

本发明公开了一种用于蓖麻毒素高灵敏度检测的新型生物条形码检测方法。该检测方法是将一种新型生物条形码检测方法应用于蓖麻毒素蛋白的检测，所述新型生物条形码检测方法是在普通生物条形码检测方法的基础上，将标记的条形码DNA链改进为单链，并将其长度延长为适于进行荧光定量PCR/TaqMan荧光探针检测的长度，三明治反应复合物中条形码DNA链不用解离，直接用基于TaqMan荧光探针的实时荧光定量PCR方法或普通PCR方法对三明治反应复合物中条形码DNA链进行定性检测的生物条形码检测方法。本发明对蓖麻毒素蛋白的高灵敏度检测具有较大的实际意义，应用前景广阔。

主权项

一种蓖麻毒素的新型生物条形码检测方法，是将一种新型生物条形码检测方法应用于蓖麻毒素蛋白的检测，所述新型生物条形码检测方法是在普通生物条形码检测方法的基础上，将标记的条形码DNA链改进为单链，并将其长度延长为适于进行荧光定量PCR/TaqMan荧光探针检测的长度，三明治反应复合物中条形码DNA链不用解离，直接用基于TaqMan荧光探针的实时荧光定量PCR方法或普通PCR方法对三明治反应复合物中条形码DNA链进行定性检测的生物条形码检测方法；所述检测方法，包括以下步骤：(1)NP探针的制备：设计适用荧光定量PCR/TaqMan荧光探针检测的条形码DNA单链，然后利用金纳米颗粒、抗蓖麻毒素蛋白的多克隆抗体和条形码DNA单链制备NP探针；(2)MMP探针的制备：用磁性微球和抗蓖麻毒素蛋白的单克隆抗体制备MMP探针；(3)条形码DNA检测：利用NP探针、MMP探针和蓖麻毒素通过抗原、抗体作用制备三明治复合物，然后将复合物上标记的条形码DNA链直接进行基于TaqMan荧光探针的实时荧光定量PCR检测或普通PCR检测，以对蓖麻毒素进行定性、定量检测；其中：所述步骤(1)中的金纳米颗粒直径为10～40nm；所述条形码DNA单链的核苷酸序列为序列表中SEQ ID No：1。