具有α淀粉酶活性的酶及其使用方法

摘要

本发明涉及α淀粉酶和编码α淀粉酶的多核苷酸。并且，也提供了设计新的α淀粉酶的方法和这些α淀粉酶的使用方法。这些α淀粉酶在酸性和碱性pH值和升高温度下具有增加的活性和稳定性。

主权项

一种分离的、合成的或重组的核酸，其包括(a)，编码具有α淀粉酶活性的多肽的序列，其中所述序列：(i)与SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，47，51，53，55，57，59，61，63，65，67，71，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，或211的核酸序列具有至少80％、85％、90％、95％、97％或100％的序列同一性；或(ii)与SEQ ID NO：45的核酸序列具有至少95％、97％或100％的序列同一性；(b)，编码具有α淀粉酶活性的多肽的序列，其中所述序列与SEQID NO.：1，13，15，17，19，21，23，27，29，31，33，37，39，43，45，55，59，61，63，65，67，71，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，或211的核酸序列在高度严格条件下杂交，其中所述高度严格杂交条件包括用含有150mM NaCl、20mM Tris盐酸，pH 7.8、1mM Na2EDTA、0.5％SDS的缓冲液于室温清洗30分钟，随后用新鲜缓冲液于比该序列的解链温度(Tm)低5℃的温度清洗30分钟；并且所述序列与SEQ ID NO：45的核酸序列具有至少95％、97％或100％的序列同一性；或与SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，47，51，53，55，57，59，61，63，65，67，71，77，79或81，83，85，87，89，91，93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，或211的核酸序列具有至少80％、85％、90％、95％、97％或100％的序列同一性；或(c)，编码具有α淀粉酶活性的多肽的序列，其中所述多肽包括与SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，48，52，54，56，58，60，62，64，66，68，72，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210或212的氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、95％、97％或100％序列同一性的氨基酸序列；或(ii)与SEQ ID NO：46的氨基酸序列具有至少97％或100％的序列同一性；(d)，(a)、(b)或(c)的序列的片段，所述片段编码酶活性片段，其中所述酶活性片段具有α淀粉酶活性；和(e)，与(a)、(b)、(c)或(d)所述的核酸序列完全互补的序列。