发明名称 |
从蓝藻中快速分离纯化C-藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白的方法 |
摘要 |
一种从蓝藻中快速分离纯化C-藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白的方法,属于藻蓝蛋白分离纯化技术领域。本发明应用经冻溶和低离子强度溶涨快速提取C-藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白,然后经硫酸铵沉淀进行初步纯化,最后利用琼脂糖凝胶FF(DEAE Sepharose Fast Flow)离子交换层析技术,用恒定的离子强度、pH梯度的缓冲液进行洗脱,一步法可以得到高纯度的C-藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白。本方法操作简便,省时省力,对设备要求简单,得率高并且大大降低了CPC和APC的制备成本,从而为将CPC和APC应用于超灵敏的生物医学检测奠定了基础。 |
申请公布号 |
CN101240010B |
申请公布日期 |
2010.06.02 |
申请号 |
CN200810014404.0 |
申请日期 |
2008.02.28 |
申请人 |
山东大学 |
发明人 |
张玉忠;颜世敢;陈秀兰;张熙颖;周百成 |
分类号 |
C07K1/14(2006.01)I;C07K1/30(2006.01)I;C07K1/18(2006.01)I |
主分类号 |
C07K1/14(2006.01)I |
代理机构 |
济南金迪知识产权代理有限公司 37219 |
代理人 |
许德山 |
主权项 |
从蓝藻中快速分离纯化C-藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白的方法,步骤如下:(1)原料为蓝藻,采用液氮研磨的方法,使蓝藻解体溶解,离心去除细胞残渣,收集上清液得到C-藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白粗提液;(2)将步骤(1)的粗提液,用硫酸铵沉淀法,使C-藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白从粗提液中沉淀出来,离心收集沉淀,再用pH5.8~6.0、20mM磷酸缓冲液溶解并透析,除去硫酸铵,即得C-藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白溶液;(3)将步骤(2)制得的C-藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白溶液,用离子交换层析,并用具有恒定的离子强度、连续pH梯度的缓冲液进行洗脱,分别获得高纯度的C-藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白。 |
地址 |
250100 山东省济南市历下区山大南路27号 |