放射线剂量的生物检测用报告质粒的应用

摘要

放射线剂量的生物检测用报告质粒的应用，以抗辐射菌－大肠杆菌间的穿梭载体为基础，构建成具有荧光素酶基因活性的抗辐射菌－大肠杆菌间的穿梭载体的报告质粒。将报告质粒转化抗辐射菌的野生型R1中，获转化体抗辐射菌，供γ－射线照射。以性状转化体的发光量为依据，测定不同剂量γ－射线照射后的发光量。本发明的报告质粒可作为高、低放射线剂量的生物检测，可广泛应用于核发电站等核设施、医院等放射线照射设施及其他具有放射源场所的检测，也可应用于环境中放射性物质的污染检测，可作为一个生物感应器来感应多种DNA损伤剂。本发明的报告质粒具有荧光素酶基因，在实时监控重组转化子的生育、分布及对环境的影响等方面也非常有用。

主权项

1、放射线剂量的生物检测用报告质粒的应用，其特征在于：以抗辐射菌-大肠杆菌间的穿梭载体为基础，与具有北美产萤火虫(Photinus pyralis)的寄主DNA由来的荧光素酶基因Luc+领域的DNA片段重组，构建成具有荧光素酶基因活性的抗辐射菌-大肠杆菌间的穿梭载体质粒；将含有上述荧光素酶基因活性质粒的抗辐射菌培养于玻璃容器内，将该容器放在需要测定的地方，被曝一定时间后取回容器，再在30C条件下继续培养24hr；取培养液10μL与等量的Bright-Glo Luciferase Assay Solution混合，1分钟后用Lumi Imager测定1分钟间的化学发光活性；根据发光量的多少估算被测地的放射性剂量。