发明名称 一种新型重组葡激酶及其制备方法
摘要 本发明属生物技术领域,具体涉及一种低聚合能力兼具防栓功能的新型重组葡激酶(RGD/KGD-Sak)的蛋白质结构和制备方法。根据对重组葡激酶单体、二聚体三维结构及其生化特性的分析,设计了新型葡激酶分子结构。通过PCR定点突变构建突变体RGD/KGD-Sak基因,然后与原核表达载体pLY-4重组,转化大肠杆菌,筛选高表达工程菌。工程菌经发酵扩增,破碎细菌,离心收集包涵体,复性后经二步法纯化RGD/KGD-Sak。所得产品冻干后,形成聚合体的能力显著下降,并能显著抑制ADP诱导的血小板的聚集,具有溶栓、防栓双重功能。
申请公布号 CN1264736A 申请公布日期 2000.08.30
申请号 CN00111627.4 申请日期 2000.01.28
申请人 上海医科大学 发明人 宋后燕;宋钢
分类号 C12N9/70;C12N15/58 主分类号 C12N9/70
代理机构 上海医科大学专利事务所 代理人 吴桂琴
主权项 1、一种新型重组葡激酶,其特征在于:改变野生型Sak二聚体结合面,即47-56位氨基酸(HR1)、104-113位氨基酸(HR2)区的疏水性氨基酸,然后构建重组表达质粒,制备新型葡激酶分子。
地址 200032上海市医学院路138号