发明名称 | 一种新型重组葡激酶及其制备方法 | ||
摘要 | 本发明属生物技术领域,具体涉及一种低聚合能力兼具防栓功能的新型重组葡激酶(RGD/KGD-Sak)的蛋白质结构和制备方法。根据对重组葡激酶单体、二聚体三维结构及其生化特性的分析,设计了新型葡激酶分子结构。通过PCR定点突变构建突变体RGD/KGD-Sak基因,然后与原核表达载体pLY-4重组,转化大肠杆菌,筛选高表达工程菌。工程菌经发酵扩增,破碎细菌,离心收集包涵体,复性后经二步法纯化RGD/KGD-Sak。所得产品冻干后,形成聚合体的能力显著下降,并能显著抑制ADP诱导的血小板的聚集,具有溶栓、防栓双重功能。 | ||
申请公布号 | CN1264736A | 申请公布日期 | 2000.08.30 |
申请号 | CN00111627.4 | 申请日期 | 2000.01.28 |
申请人 | 上海医科大学 | 发明人 | 宋后燕;宋钢 |
分类号 | C12N9/70;C12N15/58 | 主分类号 | C12N9/70 |
代理机构 | 上海医科大学专利事务所 | 代理人 | 吴桂琴 |
主权项 | 1、一种新型重组葡激酶,其特征在于:改变野生型Sak二聚体结合面,即47-56位氨基酸(HR1)、104-113位氨基酸(HR2)区的疏水性氨基酸,然后构建重组表达质粒,制备新型葡激酶分子。 | ||
地址 | 200032上海市医学院路138号 |