| 摘要 |
1. Способ выделения гепатоцитов животных вида Rana terrestris (амфибии) и Trachemys scripta elegans (черепахи), включающий в себя вскрытие брюшной полости, канюлирование, двухэтапное перфузирование, механическую обработку печени, очистку гепатоцитов, фильтрацию и дифференциальное центрифугирование, предварительную инкубацию и высевание гепатоцитов в чашки Петри с определением количества жизнеспособных гепатоцитов в камере Горяева, отличающийся тем, что вторичное перфузирование печени проводят трех-четырехкратно раствором Хэнкса, содержащим коллагеназу в концентрации 0,02-0,05% по 10 мин при температуре перфузата 0-4°С, а очистку гепатоцитов осуществляют трех-четырехкратно в фиколловом градиенте с добавлением 0,5-1,15М углеводов, например сахарозы, фильтрацию и дифференциальное центрифугирование проводят при 700 об/мин с экспозицией в 2 мин, предварительную инкубацию гепатоцитов проводят при 20-22°С в течение 20 мин. ! 2. Способ выделения гепатоцитов по п.1, отличающийся тем, что у животных вида Соlumba livia (птицы) вторичное перфузирование печени проводят трех-четырехкратно раствором Хэнкса, содержащим коллагеназу в концентрации 0,02-0,05% по 20 мин при температуре перфузата 15-16°C. |
