一种含LoxP-FRT重组酶位点的植物双元表达载体

摘要

本发明公开了一种含LoxP-FRT重组酶位点的植物双元表达载体。本发明提供了载体，为环状双链DNA分子，自5’末端至3’末端依次包括大肠杆菌复制起始原点ColEl、农杆菌复制起始原点Rep-ori、调节蛋白Rep表达框、T-DNA超驱动区、T-DNA右边界、T-DNA左边界和Kan抗性基因表达框。本发明的实验证明，本发明构建了植物表达双元载体pYBA100、pYBA200和pYBA300，其载体较小且在T-DNA区获得大量的MCS位点，离体删除实验结果证明，载体pYBA系列能经Cre重组酶删除植物标记基因表达框，可以满足用于安全生产转基因植物的需要。

主权项

一种载体，为环状双链DNA分子，自5’末端至3’末端依次包括大肠杆菌复制起始原点ColE1、农杆菌复制起始原点Rep‑ori、调节蛋白Rep表达框、T‑DNA超驱动区、T‑DNA右边界、T‑DNA左边界和Kan抗性基因表达框；所述大肠杆菌复制起始原点ColE1为序列表中序列4自5’末端第1‑589位核苷酸所示的双链DNA片段；所述农杆菌复制起始原点Rep‑ori为序列表中序列4自5’末端第590‑1385位核苷酸所示的双链DNA片段；所述调节蛋白Rep表达框为序列表中序列4自5’末端第1386‑2367位核苷酸所示的双链DNA片段；所述Kan抗性基因表达框为序列表中序列4自5’末端第2448‑3694位核苷酸所示的双链DNA片段；所述T‑DNA超驱动区为序列表中序列4自5’末端第2368‑2391位核苷酸所示的双链DNA片段；所述T‑DNA左边界为序列表中序列4自5’末端第2423‑2477位核苷酸所示的双链DNA片段；所述T‑DNA右边界为序列表中序列4自5’末端第2392‑2416位核苷酸所示的双链DNA片段；在所述T‑DNA右边界和所述T‑DNA左边界之间还包括内酶切识别位点1；所述内酶切识别位点1为MluI的识别位点；所述载体的核苷酸序列为序列表中的序列4。