一种伏马菌素B1的薄层层析测定方法

摘要

伏马菌素B1的测定方法：准确吸取2mL 1∶1的乙腈－水的混合液加入1mg伏马菌素B1标准品中，使之溶解，该标准溶液为0.5mg/mL，依次逐级配制成每毫升相当于100μg，50μg，25μg，5μg，1μg的标准样；样品加甲醇－水溶液，振荡，离心取上清液水浴蒸发近干，再用甲醇溶解，定容再离心得上清液，用活化SAX柱子过柱，洗柱后用冰乙酸－甲醇洗脱伏为样品液；在硅胶F254或HSG板上用25μg/mL的标准液和样品液点样，点样量为5μL，用体积比为55∶36∶8∶1氯仿∶甲醇∶水∶乙酸混合液展开，以香草醛液显色；与标准品斑点同一Rf值处出现色斑点，鉴定其为伏马菌素B1。

主权项

1、一种伏马菌素B1的测定方法，其特征在于薄层层析测试方法，操作步骤为：(1)制作标准溶液：准确吸取2mL体积比为1∶1的乙腈-水的混合溶液加入1mg伏马菌素B1标准品中，使之溶解，该标准溶液为0.5mg/mL；准确吸取0.2mL标准溶液于1mL离心管中，加体积比为1∶1的乙腈-水混合液至刻度，混匀；此溶液每毫升相当于100μg伏马菌素B1；按此法逐级配制成每毫升相当于50μg，25μg，5μg，1μg；(2)制作样品溶液：称取50g粉碎过120目筛的样品，置于250mL具塞锥形瓶中，加入100mL体积比为3∶1的甲醇-水溶液，盖严防漏，振荡30min后，以3000r/min速度离心混合液10min，取上清液50mL，于40～60℃水浴蒸发近干，用甲醇溶解，定容至5mL，再3000r/min离心10min，过滤得上清液，依次用5mL甲醇，5mL体积比为3∶1的甲醇-水活化SAX柱子；取3mL滤液过柱，流速≤2mL/min，然后依次用5mL体积比为3∶1的甲醇-水、3mL甲醇洗柱，用3mL体积比为1∶99冰乙酸-甲醇洗脱伏马菌素，流速≤1mL/min，洗脱液收集于5mL离心管中，作为样品分析液；(3)测试：在硅胶板上测试：在硅胶F254板上用25μg/mL的FB1标准液和样品分析液点样，点样量为5μL，用体积比为55∶36∶8∶1氯仿∶甲醇∶水∶乙酸混合液展开，喷以香草醛溶液显色；与标准品斑点同一Rf值处，出现淡灰色的斑点，鉴定其为伏马菌素B1。