发明名称 在原核细胞内产生活性异二聚体AMV-RT的方法
摘要 本发明描述了在原核细胞内,特别是在大肠埃希氏杆菌(大肠杆菌)内异源性表达来自鸟成骨髓细胞白血病病毒的逆转录酶(AMV-RT)。本发明还包括简化的纯化该异二聚体AMV-RT的一些方法。
申请公布号 CN1250728C 申请公布日期 2006.04.12
申请号 CN01140718.2 申请日期 2001.09.21
申请人 霍夫曼-拉罗奇有限公司 发明人 H·索贝克;R·米勒;M·施米德特;B·弗雷;B·苏普曼;R·施穆克;J·-P·塔尔霍菲;P·帕卢尔;M·帕亚特施
分类号 C12N15/63(2006.01);C12N15/70(2006.01);C12N15/12(2006.01);C12N15/62(2006.01);C12N15/67(2006.01);C12P21/02(2006.01);C12Q1/68(2006.01) 主分类号 C12N15/63(2006.01)
代理机构 中国专利代理(香港)有限公司 代理人 张广育;姜建成
主权项 1.一种在原核宿主细胞内产生可溶性形式的活性异二聚体AMV-RT的方法,其中(i)在一个或多个表达质粒内单独地或组合地克隆编码AMV-RTα-亚单位的DNA序列和编码AMV-RTβ-亚单位的DNA序列,(ii)将此表达质粒转化进入原核细胞,(iii)诱导表达可溶性异二聚体AMV-RT,以及(iv)从该细胞中分离出重组异二聚体AMV-RT其中是在10℃-25℃的培养温度和降低的诱导剂浓度下进行表达。
地址 瑞士巴塞尔
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