一种叶酸修饰的超顺磁氧化铁纳米颗粒的制备方法

摘要

本发明涉及一种叶酸修饰的超顺磁氧化铁纳米颗粒的制备方法，包括：温和还原法制备PEI包覆的超顺磁氧化铁纳米颗粒(USPIO-PEI)；USPIO-PEI纳米颗粒表面修饰叶酸复合物(COOH-PEG-FA)和异硫氰酸荧光素(FI)；以及纳米颗粒表面的乙酰化修饰。本发明工艺简单，反应条件温和，易于操作；制备的超顺磁氧化铁纳米颗粒粒径较小、弛豫率超高，并且具有良好的胶体稳定性、生物相容性和特定的肿瘤靶向性，在体内肿瘤靶向成像诊断领域具有潜在的应用价值。

主权项

一种叶酸修饰的超顺磁氧化铁纳米颗粒的制备方法，包括： (1)将三价铁盐溶解于超纯水中，搅拌，鼓吹氮气，然后加入亚硫酸钠溶液后，搅拌反应20‑30min，再加入超支化聚乙烯亚胺PEI水溶液和NH₃·H₂O，60‑70℃条件下，搅拌反应20‑30min，然后室温条件下反应0.5‑1.5h，分离洗涤，得到PEI包裹的超顺磁氧化铁纳米颗粒USPIO‑PEI；然后将USPIO‑PEI洗涤，分散于溶剂中；其中三价铁盐、超纯水、NH₃·H₂O的配比为1.2～1.4g:20～25mL:2～3mL，三价铁盐、亚硫酸钠、超支化聚乙烯亚胺PEI质量比为1.2～1.4:0.21～0.25:0.51～0.53； (2)将叶酸FA溶解于溶剂中，用EDC和NHS活化2‑4h，滴加到NH₂‑PEG‑COOH溶液中，搅拌反应2‑4天，透析，然后真空冷冻干燥，即得COOH‑PEG‑FA；其中FA和NH₂‑PEG‑COOH的摩尔比为1.8‑2:1； (3)将上述COOH‑PEG‑FA、EDC和NHS溶解于溶剂中，搅拌活化2‑4h，得到活化后的COOH‑PEG‑FA，然后加入步骤(1)中，搅拌反应2‑4d，分离洗涤，分散，得到USPIO‑PEI‑PEG‑FA纳米颗粒；其中活化后的COOH‑PEG‑FA与USPIO‑PEI纳米颗粒表面氨基的摩尔比为1:23～25； (4)将异硫氰酸荧光素FI溶液加入步骤(3)中，搅拌反应0.5‑1d，分离，洗涤，分散，得到USPIO‑PEI‑FI‑PEG‑FA纳米颗粒溶液；然后加入三乙胺，搅拌反应20‑40min，再加入乙酸酐，搅拌反应20‑30h，离心洗涤，分散，得到叶酸修饰的超顺磁氧化铁纳米颗粒USPIO‑PEI‑Ac‑FI‑PEG‑FA；其中FI与USPIO‑PEI表面氨基的摩尔比为1:39‑40。