| 摘要 |
1. Способ получения клеток для заместительной клеточной терапии патологий печени, включающий выделение из подчелюстной слюнной железы протоковых стволовых клеток и их последующее культивирование в присутствии факторов направленной дифференцировки до получения целевой клеточной культуры, отличающийся тем, что из протоковых стволовых клеток подчелюстной слюнной железы выделяют популяцию стволовых клеток, экспрессирующую маркеры CD49f и ЕрСАМ, выделенные клетки инкубируют в течение 4-6 дней в среде, содержащей вальпроевую кислоту в концентрации 0,1-40 мМ, культивирование в присутствии факторов направленной дифференцировки проводят в гепатоцитарной ростовой среде в три стадии: сначала в присутствии ингибитора γ-секретазы и витамина D3, затем - в присутствии онкостатина М и дексаметазона, и далее в среду добавляют интерлейкин 6 и стимулятор дифференцировки гормональной природы для завершения дифференцировки, а целевую культуру идентифицируют по экспрессии маркеров 1ААТ, РЕРСК, G6P, TDO, специфических для печени цитохромов Р450, альбумина и по способности синтезировать мочевину.2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве гепатоцитарной ростовой среды используют среду, содержащую ростовую среду DMEM/F12, 7-20% фетальной телячьей сыворотки, 2 мМ глутамина, 1% ИТС (инсулин-трансферрин-селенит), 0,03 мМ никотинамида, 5-60 нг/мл гепатоцитарного ростового фактора (HGF) и 5-80 нг/мл эпидермального ростового фактора (EGF). |
