一种白土苓基原植物DNA分子鉴别方法

摘要

本发明公开一种白土苓DNA分子鉴别方法，特别是白土苓中短柱肖菝葜、华菝葜中DNA分子鉴别方法。本发明是通过总DNA的提取、目的片段的PCR扩增及序列测定、DNA序列分析及植物鉴别而实现的，所述短柱肖菝葜的鉴别特征位点为188bp的C/A替代和275-311bp的序列为AATAATATATTAATTTAATTTTAAAATAATATATTAA；所述华肖菝葜在260-299bp的序列为TTATTTTGATAATATATAATATATATATAATATAATATTA。本发明白土苓DNA分子鉴别方法具有高度的准确性，为白土苓的鉴别提供了快速、实用的方法。

主权项

一种短柱肖菝葜、华肖菝葜的DNA分子鉴别方法，其特征在于通过如下步骤实现：（1）总DNA的提取：取待测短柱肖菝葜、华肖菝葜植物叶片，提取获得总DNA；（2）PCR扩增：选取叶绿体DNA基因间序列引物引物1：Forward‑Primer：5’‑TTGAGCTCCATCTACAAATGG‑3’引物2：Reverse‑Primer：5’‑CCCTTATCTAGCTAAAGGATT‑3’进行PCR扩增，扩增结果用1.0%琼脂糖凝胶电泳检测；（3）目的片段的序列测定：PCR扩增产物直接测序；（4）DNA序列分析及植物鉴别：测序结果先用Contig Express序列比对软件校序，再用BioEdit序列编辑软件对序列进行编辑，寻找种间变异位点，结果为：其中所述短柱肖菝葜的鉴别特征位点为188bp的C/A替代和275‑311bp的序列为AATAATATATTAATTTAATTTTAAAATAATATATTAA；所述华肖菝葜在260‑299bp的序列为TTATTTTGATAATATATAATATATATATAATATAATATTA。