从血液中分离免疫细胞的方法及其在治疗疾病中的应用

摘要

本发明涉及一种简单有效的血液免疫细胞的提取方法，以及相配套使用的冻存和复苏的方法，以及复苏后免疫细胞扩增的方法，其包括如下步骤：全血样本预处理、Ficoll法分离、MNC收集和洗涤、MNC计数、MNC冻存、细胞复苏、MNC计数和细胞扩增。本发明发现使用特定操作步骤的提取、冻存、复苏以及扩增，可以有效地获得免疫细胞，该免疫细胞可用于治疗肿瘤。

主权项

从血液中提取免疫细胞的方法，该方法包括以下分离步骤：(1)全血样本预处理：将血样本充分混匀，转移至离心容器中，稀释血液；(2)Ficoll法分离：取离心容器，加入Ficoll细胞分离液，然后将稀释后的血液样本加入Ficoll细胞分离液的上层，将离心容器置于离心装置中，离心处理；(3)单个核细胞收集和洗涤：离心处理结束后，将上层血浆转移至离心容器，吸取白膜层于离心容器内，补充生理盐水，混匀后再次离心处理，待细胞沉淀后洗涤两次；以及任选的下列步骤：(4)针对步骤(3)所得免疫细胞，检测以下项目的至少一项：单个核细胞总数、单个核细胞活率、细胞污染、遗传病、HLA‑ABC/DR配型。