一种同时测定山药中尿囊素和腺苷含量的方法

摘要

本发明公开了一种同时测定山药中尿囊素和腺苷含量的方法，包括对照品标准曲线的制作、山药待测样品的前处理及测定，其中待测样品的前处理为：将山药样品用体积分数为20％-60％的甲醇水溶液进行超声提取20-40min，摇匀后取部分提取液至离心管离心，吸取上清液后采用滤膜过滤得到待测样品溶液；所述山药待测样品的测定采用液相色谱串联质谱法。本发明结合了色谱和质谱的优点，特异性强、灵敏度高，可同时达到鉴定和质量控制的目的，为山药及其饮片的质量控制提供了参考依据。

主权项

一种同时测定山药中尿囊素和腺苷含量的方法，其特征在于，包括对照品标准曲线的制作、山药待测样品的前处理及测定，其中待测样品的前处理为：将山药样品用体积分数为20％‑60％的甲醇水溶液进行超声提取20‑40min，摇匀后取部分提取液至离心管离心，吸取上清液后采用滤膜过滤得到待测样品溶液；所述山药待测样品的测定采用液相色谱串联质谱法，其中，标准曲线的制作：将减压干燥至衡重的尿囊素和腺苷对照品，加入与待测样品前处理使用的浓度相同的甲醇水溶液制备不同浓度的对照品混标溶液，采用液相色谱串联质谱方法进行测定，其中尿囊素采用正离子模式，腺苷采用负离子模式，以尿囊素或腺苷的色谱峰面积为纵坐标，其相对应浓度为横坐标进行线性回归制作标准曲线；山药待测样品的测定：将待测样品经前处理，通过液相色谱串联质谱方法进行测定，其中尿囊素采用正离子模式，腺苷采用负离子模式，得出尿囊素或腺苷的色谱峰面积，代入标准曲线计算得出山药待测样品中尿囊素和腺苷的含量；所述液相色谱串联质谱法测定的色谱条件包括：色谱柱：Pursuit C182.0*100mm，3.0μm；柱温：30℃；流动相为甲醇和水，等度洗脱，分析时间为8min，其中所述流动相体积比为甲醇:水＝10:90，流速为0.20ml/min；进样量：3μl；所述液相色谱串联质谱法测定的质谱条件包括：电喷雾离子源(ESI)；检测器毛细管电压1.3kV；电喷雾电压5kV；离子源温度50℃；脱溶剂气温度300℃；干燥气压力20psi；雾化气压力50psi；多级反应监测(MRM)模式测定；采用正、负离子切换扫描模式进行测试，其中尿囊素采用正离子模式，监测母离子为m/z 156.7，子离子为113.6和96.6，毛细管电压为‑45V，碰撞能量分别为10.5V和13.0V，腺苷采用负离子模式，监测母离子为m/z 268.2，子离子为135.9和252.7，毛细管电压为55V；碰撞能量分别为16.0V和5.0V。