发明名称 一种污水处理系统中氨氧化古细菌富集培养的方法
摘要 本发明提供一种污水处理系统中氨氧化古细菌富集培养的方法,包括以下几个步骤:A、配制氨氧化菌群富集培养基;B、氨氧化菌群的富集培养:将含有氨氧化古细菌的生物膜或活性污泥接种于富集培养基中;C、配制氨氧化古细菌的富集培养基:氨氧化菌群的富集培养基中添加抗生素;D、氨氧化古细菌的富集培养:用过滤器将富集培养液过滤后转接到步骤C中的氨氧化古细菌富集培养基中,得到纯度较高的氨氧化古细菌的富集培养液。纯度较高的氨氧化古细菌富集培养液为氨氧化古细菌生理生化特性的研究提供了可能,氨氧化古细菌具有较强的耐性,若将氨氧化古细菌引入到氨氧化强化技术之中,将对提高污水处理生物脱氮能力具有重要的现实意义。
申请公布号 CN103451120B 申请公布日期 2016.01.20
申请号 CN201310041633.2 申请日期 2013.02.04
申请人 哈尔滨工业大学深圳研究生院 发明人 金文标;李志鑫;岳洋洋;梁昭云
分类号 C12N1/20(2006.01)I 主分类号 C12N1/20(2006.01)I
代理机构 深圳市科吉华烽知识产权事务所(普通合伙) 44248 代理人 胡吉科;孙伟
主权项 一种污水处理系统中氨氧化古细菌富集培养的方法,其特征在于,包括以下几个步骤:A、配制氨氧化菌群富集培养基; B、氨氧化菌群的富集培养:将含有氨氧化古细菌的生物膜或活性污泥接种于氨氧化菌群富集培养基中; C、配制氨氧化古细菌的富集培养基:氨氧化菌群的富集培养基中添加抗生素;D、氨氧化古细菌的富集培养:用过滤器将氨氧化菌群富集培养液过滤后将滤液转接到步骤C中的氨氧化古细菌富集培养基中,得到纯度高的氨氧化古细菌的富集培养液;所述步骤A中,氨氧化菌群富集培养基包括:NaCl 、MgCl<sub>2</sub> · 6H<sub>2</sub>O、KCl 、CaCl<sub>2</sub> 、KBr 、KH<sub>2</sub>PO<sub>4</sub>,NaCl 、MgCl<sub>2</sub> · 6H<sub>2</sub>O、KCl 、CaCl<sub>2</sub> 、KBr和KH<sub>2</sub>PO<sub>4</sub>的质量比为10:4:5:1:1:2;所述步骤A中,氨氧化菌群富集培养基的配制方法包括:将氨氧化菌群富集培养基中的溶液在121℃下灭菌30min,然后加入用0.2μm滤膜过滤后的NH<sub>4</sub>Cl溶液、NaHCO<sub>3</sub>溶液、EDTA Na‑Fe溶液、丙酮酸钠溶液、微量元素、维生素和硒钨溶液;NH<sub>4</sub>Cl溶液、NaHCO<sub>3</sub>溶液的的溶液浓度为1M;所述步骤A中,微量元素配制方法:1.5g FeCl<sub>2</sub>· 4H<sub>2</sub>O先溶于10mL HCl,然后加入CoCl<sub>2</sub>· 6H<sub>2</sub>O:190mg,MnCl<sub>2</sub>· 6H<sub>2</sub>O:100mg,ZnCl<sub>2</sub>:70mg,HBO<sub>3</sub>:62mg,Na<sub>2</sub>MoO<sub>4</sub>· 2H<sub>2</sub>O:36mg,NiCl<sub>2</sub>· 6H<sub>2</sub>O:24mg,CuCl<sub>2</sub>· 2H<sub>2</sub>O:17mg,加水定容至1000mL;维生素配方为:4‑氨基苯甲酸:40mg,D‑生物素:10mg,烟酸:100mg,钙D‑泛酸钙:50mg,吡哆醇盐酸盐:150mg,水1000mL,再用10mM磷酸钠缓冲溶液调pH值为7.1;硒钨溶液配方:NaOH:0.4g,Na<sub>2</sub>SeO<sub>3</sub>· 5H<sub>2</sub>O:6mg,Na<sub>2</sub>WO<sub>4</sub>· 2H<sub>2</sub>O:8mg,水1000mL;所述步骤B中, pH值为7.2‑7.5,在温度为37±1℃的培养箱中静置培养;所述抗生素包括青霉素、链霉素和氨苄青霉素,青霉素、链霉素和氨苄青霉素的添加浓度均为50mg/L;所述步骤D中,过滤器采用0.45μm膜针头式过滤器。所述步骤D中,调节pH值为7.2‑7.5,在温度为37±1℃的培养箱中静置培养。所述步骤B中,培养时间以14‑16天为一代培养周期,黑暗的环境中培养2个周期,并隔2‑3天补充NH<sub>4</sub>Cl和NaHCO<sub>3</sub>;所述步骤D中,黑暗的环境中培养3个周期,并隔3‑5天补充NH<sub>4</sub>Cl和NaHCO<sub>3</sub>,得到纯度较高的氨氧化古细菌富集培养液。
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