一种制备细胞外基质支架材料的脱细胞方法

摘要

本发明涉及组织工程材料领域。具体地说，本发明涉及一种制备细胞外基质支架材料的脱细胞方法，其中采用绿色表面活性剂吡喃葡萄糖苷进行脱细胞处理，不仅能完全去除细胞而且保持了ECM支架的超微结构和组成成分。

主权项

一种制备细胞外基质支架材料的脱细胞方法，包括以下步骤：a.对待用组织器官进行预处理；b.将经过预处理的待用组织器官加入到含有吡喃葡萄糖苷的溶液中，通过低渗溶液振荡处理；c.将步骤b处理后的组织器官加入到含有核酸酶的溶液中；以及d.洗涤制备的细胞外基质支架材料，其中所述的核酸酶溶液的配制是在含有0.15M氯化钠和1‑5mM氯化镁的无菌的pH 6.8‑8.6、0.02‑0.05M Tris‑HCl缓冲液中加入100‑10000u/ml的脱氧核糖核酸酶和核糖核酸酶，在37℃环境中60‑360rpm转速下振荡处理12‑72小时，其中所述的吡喃葡萄糖苷浓度小于70％(w/v)，含有吡喃葡萄糖苷的溶液的温度范围为1℃‑40℃，含有吡喃葡萄糖苷的溶液的pH值范围为5‑12，处理时间为30分钟‑96小时。